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测试物在肝微粒体中的代谢产物鉴定(CD1小鼠、SD大鼠、比格犬、食蟹猴、人)

发布时间:2021-04-01 16:36 |  点击次数:

试验1B:测试物在肝微粒体中的代谢产物鉴定(CD1小鼠、SD大鼠、比格犬、食蟹猴、人)
目的:1)体外评价测试物在5个种属的肝微粒体中的代谢产物,用于支持后续试验的动物种属选择;2)初步评估在人体中的潜在主要代谢产物。  
测试物数目 1
测试系统:混合肝微粒体(CD1小鼠、SD大鼠、比格犬、食蟹猴、人) 5
测试浓度:10-20 μM(除特殊要求外) 1
孵育时间:0 分钟,30 分钟或60 分钟或120 分钟(具体根据测试物在孵育体系中的消除速率确定) 2
样本量:1个样本 1
孵育条件:
  • 微粒体蛋白质浓度:2-5 mg/mL
  • NADPH浓度:2 mM
  • UDPGA浓度:2 mM
  • 水浴温度:37.0 oC
 
对照组:
  • 系统阳性对照:CYP3A4探针底物美达唑仑和UGT探针底物7-羟基香豆素与微粒体孵育,用于评价测试系统正常工作。
  • 阴性对照:在没有辅酶NADPH/UDPGA条件下孵育。
  • 空白对照:用空白PBS代替测试物在有 NADPH UDPGA 的条件下与肝微粒体孵育。
 
试验参数:
  • 母药的提取离子流色谱图,一级质谱图和二级质谱图。
  • 母药和潜在代谢产物的保留时间、元素组成、相对丰度(根据质谱峰面积粗略计算所得)和偏差。
  • 母药和潜在代谢产物的结构解析。
  • 推测的代谢途径。
 
试验周期:30个工作日